Live/Dead 染色（FDA/PI双染色）
原理：  
    二乙酸荧光素(FDA)能够进入细胞,但本身无荧光。在细胞的非特异性脂酶的催化下,FDA生成荧光素,后者经480nm激光激发出波长530nm左右的绿色荧光。死细胞的细胞膜不完整,生成的荧光素很快扩散出细胞,不能检测到带有绿色荧光的细胞。   碘化丙锭(PI)不能进入具有完整细胞膜的活细胞,当酵母细胞死亡或细胞膜不完整时,PI进入细胞,与DNA相结合,在488nm的激光激发下,在波长660nm左右检测到红色荧光。  因此,通过FDA/PI双染色的方法,利用死活细胞在经染色后会激发出不同波长的荧光的特点,即活细胞可检测到FDA产生的荧光信号,而无PI产生的荧光信号,死细胞则相反,这样就可以将死活细胞区分开来。   
 
实验步骤：  
1. 配置贮存液：配置FDA贮存液（5 mg/ml，溶于丙酮，储存于-20度）和PI 贮存液（5 mg/ml，溶于PBS或水，储存于4度）。  
2. 染色时，将样品放置在孔板内，加入1mlPBS，再分别加入1μlFDA和1μlPI 贮存液（稀释1000倍），染色5min。  
3. 洗弃染色液，PBS漂洗，荧光显微镜下观察、照相。
 

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