1 产品介绍
本试剂盒包括酵母感受态细胞、Solution 1和Solution 2。其中酵母感受态细胞是用于转化的细胞,需-70度低温保存;Solution 1和Solution2为转化时使用的试剂,均为无菌,需-20度保存,使用时解冻即可。本酵母感受态细胞采用专利技术制备的感受态,有别于传统山梨醇制备的感受态细胞,并配有Solution 1和Solution 2,可直接用于热击法转化,而不需要使用电转仪和电击杯。本方法是电击法的替代方法,也避免了LiCl方法需要现制备感受细胞的繁琐。转化效率可以达到102-103cfu/ug线性化DNA,经本公司反复验证-80保存6个月不影响转化效率。
2 转化步骤
2.1 线性化质粒片段的制备
取过夜培养的质粒菌种3ml,使用质粒抽提试剂盒抽提质粒,最后溶解于50ul的TE或水中。将所有的质粒片段在200μl的体系中酶切线性化。用酚氯仿试剂去除蛋白并且浓缩片段至20ul体系中(保证有10μg的质粒片段)。
2.2 转化
2.2.1直接加于冻结的酵母细胞中,以获得最大转化率; (注意加入至冻结的细胞中,而不是解冻的细胞中);
2.2.2. 加入后迅速放入37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;
2.2.3. 取出离心管,加入1.0ml Solution 1,彻底混匀;(注意可以弹或移液器轻轻混合,不可用移液器剧烈来回混合也不可用涡旋振荡器) ;
2.2.4. 30℃水浴孵育1h;
2.2.5. 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于0.8ml Solution 2中;
2.2.6. 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml Solution 2中;
2.2.7. 将所有转化液铺于选择性平板(例如MD板),于30℃孵育3~4天后,鉴定;
3 注意事项
1.转化步骤1中DNA要加入至冻结的细胞中,注意不可解冻细胞后再加入DNA;
2.转化步骤2中混合样品是必需的;
3.转化步骤3中要充分混匀,但不可剧烈混合;
4.所有混合细胞均要轻柔;
5.若有任何问题,请致电本公司或联系客服shanghaishengwu.taobao.com
本试剂盒包括酵母感受态细胞、Solution 1和Solution 2。其中酵母感受态细胞是用于转化的细胞,需-70度低温保存;Solution 1和Solution2为转化时使用的试剂,均为无菌,需-20度保存,使用时解冻即可。本酵母感受态细胞采用专利技术制备的感受态,有别于传统山梨醇制备的感受态细胞,并配有Solution 1和Solution 2,可直接用于热击法转化,而不需要使用电转仪和电击杯。本方法是电击法的替代方法,也避免了LiCl方法需要现制备感受细胞的繁琐。转化效率可以达到102-103cfu/ug线性化DNA,经本公司反复验证-80保存6个月不影响转化效率。
2 转化步骤
2.1 线性化质粒片段的制备
取过夜培养的质粒菌种3ml,使用质粒抽提试剂盒抽提质粒,最后溶解于50ul的TE或水中。将所有的质粒片段在200μl的体系中酶切线性化。用酚氯仿试剂去除蛋白并且浓缩片段至20ul体系中(保证有10μg的质粒片段)。
2.2 转化
2.2.1直接加于冻结的酵母细胞中,以获得最大转化率; (注意加入至冻结的细胞中,而不是解冻的细胞中);
2.2.2. 加入后迅速放入37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;
2.2.3. 取出离心管,加入1.0ml Solution 1,彻底混匀;(注意可以弹或移液器轻轻混合,不可用移液器剧烈来回混合也不可用涡旋振荡器) ;
2.2.4. 30℃水浴孵育1h;
2.2.5. 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于0.8ml Solution 2中;
2.2.6. 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml Solution 2中;
2.2.7. 将所有转化液铺于选择性平板(例如MD板),于30℃孵育3~4天后,鉴定;
3 注意事项
1.转化步骤1中DNA要加入至冻结的细胞中,注意不可解冻细胞后再加入DNA;
2.转化步骤2中混合样品是必需的;
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4.所有混合细胞均要轻柔;
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关于订购方式:
(1)直接注册www.ruichubio.com网站会员后直接在线订购支持支付宝、微信和公务卡支付;
(2)拨打021-59145618订购热线订购;
(3)直接登录shanghaishengwu.taobao.com淘宝旗舰店订购;
(3)登录www.ruichubio.com下载中心下载订购单发送至:order@ruichubio.com订购
注:在邮件确认合同或订购单情况下,可以货物和发票一起寄送,对公转账。
关于发票:
本公司出具增值税普通发票和增值税专用发票,适合您报销。发票面额为含税后的货物价格和运费,请您放心购买,我们会将运费开进发票里。请在拍下时在备注一栏里写上发票抬头。
关于支付:
开票账户:
公司名称 上海瑞楚生物科技有限公司
电话 021-60543596
纳税人识别号 91310116057685530X
开户银行全称 中国银行股份有限公司上海市长宁支行
帐号 454663168779
公司名称 瑞楚生物科技(江苏)有限公司
公司名称 上海瑞楚生物科技有限公司昆山分公司
电话 021-60543596
纳税人识别号 91320583MA1Q4P344Y
开户银行全称 昆山农商银行
帐号 3052251012019000000826
行号 314305206650
不开票账户: 上海瑞楚生物科技有限公司唯一指定财务个人账户
帐户名 姜自军
开户银行 中国建设银行上海第六支行
账号 6227 0012 1588 0600 909
支付宝转账请支付到如下账户
帐 户 名 上海瑞楚生物科技有限公司
账 号 epay@ruichubio.com
为了方便高校科研单位公务卡结算,本网站开通了公务卡支付。可以在线下单选择支付宝付款,登录支付宝账号添加银行卡(输入公务卡号就可以)(公务卡一般就是信用卡,请按信用卡支付方式支付)。
关于运输:
(1)生物试剂需要冷冻运输,运输需要泡沫盒和一定量的冰袋(特殊商品需要干冰),运费金额会开进发票里。运费以显示为准
(2)常规试剂采用快递,运费以显示为准。
(3)大物件一般默认发德邦物流,运费需联系客服计算。
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公司名称 瑞楚生物科技(江苏)有限公司
注册地址 阜宁经济开发区刘阳路5号
电 话 18516055561
纳税人识别号 91320923MA1YH04C6Q
开户银行全称 江苏阜宁农村商业银行股份有限公司迎宾支行
帐号 3209230321010000023542
行号 314311300360
行号 314311300360
公司名称 上海瑞楚生物科技有限公司昆山分公司
电话 021-60543596
纳税人识别号 91320583MA1Q4P344Y
开户银行全称 昆山农商银行
帐号 3052251012019000000826
行号 314305206650
不开票账户: 上海瑞楚生物科技有限公司唯一指定财务个人账户
帐户名 姜自军
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账号 6227 0012 1588 0600 909
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(1)生物试剂需要冷冻运输,运输需要泡沫盒和一定量的冰袋(特殊商品需要干冰),运费金额会开进发票里。运费以显示为准
(2)常规试剂采用快递,运费以显示为准。
(3)大物件一般默认发德邦物流,运费需联系客服计算。