动物/细胞基因组DNA提取试剂盒 货号 名称 规格 RTG2402-01 动物/细胞基因组DNA提取试剂盒 50次 RTG2402-02 动物/细胞基因组DNA提取试剂盒 100次
试剂盒内容及保存： 试剂盒组成 RTG2402-01 （50次） RTG2402-02 （100次） 贮存方式 缓冲液GA 15 ml 30 ml 室温 缓冲液GB 15 ml 30 ml 室温 去蛋白液GD（浓缩液） 18 ml 36 ml 室温 漂洗液PW（浓缩液） 25 ml 25ml 室温 洗脱缓冲液EB 15 ml 15 ml 室温 蛋白酶K（20 mg/ml） 1ml 2×1ml -20℃ RNase A（10 mg/ml） 0.5 ml 1 ml -20℃ 吸附柱CG 50个 100个 室温 收集管（2 ml） 50个 100个 室温 说明书 1份 1份  
储存条件和效期： 本试剂盒在室温（25℃左右）干燥条件下，可保存1年；更长时间的保存可置于2–8℃。2–8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。单独包装的蛋白酶K和RNaseA收到后最好按照需要分装成小管，-20℃保存。

产品简介：： 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，能提取多种细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。 使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
提取得率： 材料 提取量 DNA得量 动物细胞培养液 106–107 cells 5–30 μg 动物组织 30 mg 10–30 μg
准备工作： 1. 准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。 2. 按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。 3. 每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
操作步骤： 如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1. 处理材料： a.培养细胞：贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液（如用PBS缓冲液或类似缓冲液），10,000 g离心1分钟，倒尽上清，加入200 μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。 b. 组织：取约30mg动物组织（脾组织用量应少于10 mg）加入到事先盛有200μl 缓冲液GA的1.5ml离心管中，用研磨杵彻底将组织研碎。 2. 加入20μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。 a. 提取细胞基因组时，加入蛋白酶K混匀后，55℃放置5-10分钟。 b.提取组织基因组时，加入蛋白酶K混匀后，在55℃放置，直至组织溶解。 注：不同组织裂解时间不同，通常需1-3小时即可完成（鼠尾需要消化过夜）,期间间歇颠倒混匀样品。 3. 加入10μl RNaseA（10 mg/ml）溶液，混匀后室温放置2分钟。 4. 加入220 μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。 注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置一段时间后会消失。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，会影响DNA的纯度和得率，而且可能导致步骤6中离心柱堵塞。 5．加入220 μl无水乙醇，颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。 注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤6中离心柱的堵塞。 6．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG中（吸附柱放入收集管中），11,000g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱CG放回收集管中。 注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到5分钟。 7．向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。 8．向吸附柱CG中加入700μl 漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。 9．向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液。 10．将吸附柱CG放回废液收集管中，11,000g离心2分钟。 注：此步骤非常重要，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。 11．将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加100 μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11,000g离心2分钟。 注；1. 洗脱缓冲液体积最好不少于100 μl，体积过小影响回收效率。 2. 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。 12. DNA产物-20℃保存。 核酸提取产品发表文章 1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterizedampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection ofTilletia controversa Kuhn. Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: Letters in Applied Microbiology 2009,49,235-240 Institution：Institute ofPlant Protection ,Chinese Academy of Agricultural Sciences Paper link： https://doi.org/10.1111/j.1472-765X.2009.02645.x   2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-allelesand development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying theS-genotype in apple cultivars. Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li Product: RTP2201琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: Tree Genetics & Genomes (2010)6:161–168 Institution：ChinaAgricultural University Paper link： https://link.springer.com/article/10.1007/s11295-009-0237-6   3. [2010 IF=0.921] An ISSR-based Approach for the MolecularDetection and Diagnosis of Dwarf Bunt of Wheat, Caused by Tilletia controversaKuhn. Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: J Phytopathol 159:155–158 (2011) Institution：State KeyLaboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of PlantProtection, CAAS Paper link：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1439-0434.2010.01735.x   4. [2010 IF=1.359] Curing the Plasmid pXO2 from Bacillusanthracis A16 Using Plasmid Incompatibility. Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao,Hengliang Wang Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: Curr Microbiol (2011) 62:703–709 Institution：State KeyLaboratory of Pathogen and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s00284-010-9767-2   5. [2010 IF=1.993] Computation-assisted SiteFinding-PCR forisolating flanking sequence tags in rice Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, andChengcai Chu Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: BioTechniques Vol. 51 | No. 6 | 2011 Institution：Institute ofGenetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences Paper link：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22150334/   6. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in majorhistocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance toinfectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss(Walbaum, 1792). Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang Product: RTP2202 PCR产物纯化试剂盒 Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240 Institution：College ofAnimal Science and Technology, Gansu Agricultural University Paper link：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/jai.12326   7. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzymeactivity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaenacambodiana. Author: Xing-Hong Wang，Changhe Zhang Product: RTP2202 PCR产物纯化试剂盒 Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107 Institution：Yunnan Instituteof Microbiology, Yunnan University Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s11033-012-2032-y   8. [2013 IF=1.687] Tobacco Arabinogalactan Protein NtEPc CanPromote Banana (Musa AAA) Somatic Embryogenesis. Author: H. Shu & L. Xu & Z. Li & J. Li & Z. Jin & S. 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Author: Shuanglin Jiang,, Mengting Shang,Kui Mu，Nan Jiang，Haiyan Wen，Rong Wang，Hai Wu，Wenyong Li Product: RTG2402 动物/细胞基因组DNA提取试剂盒 Journal: Ecotoxicology and EnvironmentalSafety 165 (2018)484–494 Institution：Key Laboratoryof Embryo Development and Reproductive Regulation of Anhui Province, FuyangNormal University Paper link：http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0147651318309011   13. [2018 IF=8.063] ATF4 destabilizes RET through nonclassicalGRP78 inhibition to enhance chemosensitivity to bortezomib in humanosteosarcoma Author: Jie Luo,# Yuanzheng Xia,# Yong Yin, Jun Luo, Mingming Liu, Hao Zhang,Chao Zhang, Yucheng Zhao, Lei Yang, and Lingyi Kong Product: RTP2101 高纯质粒小提试剂盒 Journal: Theranostics 2019, Vol. 9, Issue 21 Institution：School ofTraditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University Paper link：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31534554   14. [2020 IF=1.857] Characterization and DevelopmentalExpression Patterns of Four Hexamerin Genes in the Bumble Bee, Bombusterrestris (Hymenoptera: Apidae). Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒 Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8 Institution：Institute ofApicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences Paper link：https://doi.org/10.1093/jisesa/ieab078   15. [2020 IF=1.336] Isopentenyl Diphosphate Isomerase (IPI)Gene Silencing Negatively Afects Patchouli Alcohol Biosynthesisin Pogostemon cablin Author: Wuping Yan, Yuzhang Yang, Yougen Wu, Jing Yu, Junfeng Zhang,Dongmei Yang, Zeeshan Ul Haq Muhammad Product: RTP2102 普通质粒小提试剂盒 Journal: Plant Molecular Biology Reporter Published 27 January 2021 Institution：Collegeof Horticulture, Hainan University Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s11105-020-01269-0   16. [2021 IF=6.064] Genome resequencing and transcriptomeanalysis reveal the molecular mechanism of albinism in Cordyceps militaris. Author: Ying Zhao, YuDong Liu, Xun Chen and JunXiao Product: RTG2407 真菌基因组DNA提取试剂盒 Journal: Fronties inMicrobiology.  Published 11 April 2023 Institution： Institute of Edible Fungi, LiaoningAcademy of Agricultural Sciences Paper link：https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2023.1153153/full

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