RealPure®Plant Seed RNA Extraction Kit RealPure®植物种子RNA提取试剂盒
试剂盒内容及保存： 试剂盒组成 RTR2308-01 （50次） 贮存方式 裂解液RSL 30 ml 常温 缓冲液PRS 3 ml 常温 裂解液RL plus 30 ml 常温 去蛋白液RD 30 ml 常温 漂洗液RW（浓缩液） 25 ml 首次使用按照标签加入无水乙醇 常温 RNase-free水 5 ml 4℃ DNA清除柱CS（RNase-free） 50个 常温 RNA吸附柱CR（RNase-free） 50个 常温 收集管 100个 常温 2 ml离心管（RNase-free） 50个 常温 1.5 ml离心管（RNase-free） 150个 常温 说明书 1份  
储存条件和效期： RNase-free水4℃保存；其他试剂在常温（25℃左右）干燥条件下，可保存1年。试剂盒常温运输。

产品简介：： 本试剂盒可从植物种子中快速提取总RNA，通过独特的裂解系统，快速去除植物组织中的淀粉、多糖等成分，释放RNA。试剂盒配套缓冲液PRS（Phenolic Remove Solution）可以去除种子中的多糖多酚对RNA提取的影响。另外，试剂盒配套DNA清除柱，可以消除基因组DNA的污染。整个提取过程仅需20-30分钟内即可完成，可以从50mg植物种子中提取数十微克高纯度RNA，基本没有DNA和蛋白的污染，可用于Northernblot、Dot blot、polyA筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等实验。 已经测试的植物种子有：拟南芥干种子、小麦干种子、水稻干种子、芝麻种子、玉米干种子、豌豆种子、红豆干种子、绿豆干种子、向日葵种子、西瓜种子、油莎豆、花生、大豆等。另外，该试剂盒也适合于提取块茎、鳞茎的RNA。 植物RNA提取介绍： 由于植物种类繁多，不同的植物种类和部位的样品使用本试剂盒效果不同。我们已经测试成功的植物列表如下： 植物样品种类 提取植物材料 是否添加缓冲液PRS 推荐裂解液 RNA质量度 RNA得量 A260/280 A260/230 简单植物叶片、幼苗、茎 玉米叶片 - 裂解液RL     30-40 μg/100 mg 小麦叶片 - 裂解液RL     40-50 μg/100 mg 水稻叶片 - 裂解液RL     45-55 μg/100 mg 拟南芥叶片 - 裂解液RL     10-15 μg/100 mg 烟草叶片 - 裂解液RL     40-55 μg/100 mg 绿萝叶片 - 裂解液RL 1.87 2.21 5-10 μg/100 mg 多糖多酚植物叶片 银杏叶片 + 裂解液RL     10-15 μg/50 mg 松针 + 裂解液RL     10-15 μg/50 mg 毛白杨叶片 + 裂解液RL     20-30 μg/50 mg 冬青叶片 + 裂解液RL     1-5 μg/50 mg 法国梧桐样品 + 裂解液RL 2.14 1.97 10-20 μg/50 mg 种子 黄豆种子 + 裂解液RSL     40-50 μg/50 mg 花生种子 + 裂解液RSL     20-25 μg/50 mg 玉米种子 +/- 裂解液RSL 2.00 2.37 20-40 μg/50 mg 水稻种子 + 裂解液RSL     5-10 μg/50 mg 小麦种子 +/- 裂解液RSL 2.03 2.28 10-15 μg/50 mg 高粱种子 + 裂解液RSL     5-10 μg/50 mg 绿豆种子 + 裂解液RSL     5-10 μg/50 mg 油莎豆 + 裂解液RSL 2.26 2.17 7-15 μg/50mg 拟南芥种子 + 裂解液RSL 2.17 1.98 3-5μg/50mg 南瓜籽 + 裂解液RSL 2.27 1.68 10-15μg/50mg 水果果肉 芒果 + 裂解液RL     1-2 μg/50 mg 西红柿 + 裂解液RL     2-3 μg/50 mg 苹果 + 裂解液RL     3-5 μg/50 mg 西瓜 + 裂解液RL     1-2μg/50 mg 香蕉 + 裂解液RL     2-3 μg/50 mg 梨 + 裂解液RL     3-5 μg/50 mg 真菌材料 香菇菌丝体 - 裂解液RL/RSL     2-3 μg/100 mg 平菇菌丝体 - 裂解液RL     2-3 μg/100 mg 块茎 马铃薯 +/- 裂解液RSL     10-15 μg/50 mg 紫薯 +/- 裂解液RSL 2.35 1.91 2-5 μg/50 mg 注：+ 表示添加，-表示不添加， +/- 表示添加不添加均可， NA表示无数据
准备工作： 1操作前在裂解液RSL中加入β-巯基乙醇至终浓度5%，如500μl RSL中加入25μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RSL4 ℃可放置3天。 2按照标签所示在漂洗液RW中加入无水乙醇（自备），混匀后盖紧瓶盖后常温贮存备用。 3准备65℃水浴 4所有离心步骤均在常温下进行。
操作步骤： 1. 样品处理: 1.1 1.5 ml RNase-free离心管中加入500 μl裂解液RSL（使用前请先检查是否已加入β-巯基乙醇），50μl缓冲液PRS混匀备用。    注：缓冲液PRS有助于去除样品中的多糖和多酚，禾本科植物如水稻，小麦和玉米的种子RNA提取中可以不用添加；如不能判断材料是否含多糖和多酚，请加入缓冲液PRS。 1.2将种子加入到液氮预冷的研钵中，用研杵研磨，其间不断加入液氮，直至研磨成粉末状。取20-50 mg粉末迅速加入到离心管中，涡旋剧烈震荡混匀，65℃水浴放置5分钟，间歇混匀。 注：一定不要加入超过50 mg的粉末，否则样品超过裂解液RSL的裂解能力导致RNA提取失败。 2. 离心取上清： 13,000 rpm离心5min，小心吸取收集管中的上清至1.5 ml RNase-free的离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。一般可获得400 μl上清。 注：一些种子富含油脂如花生种子，离心后脂肪位于最上层，用吸头穿越脂肪层吸取上清；禾本科植物如水稻，小麦，玉米，高粱种子会有大量沉淀生产。 3. 去除基因组污染： 上清中加0.5倍体积的无水乙醇（如400 μl上清中加入200 μl无水乙醇），混匀（此时可能会出现沉淀），得到的溶液和沉淀一起转入DNA清除柱CS（清除柱放入收集管中）中，13,000 rpm离心2分钟，弃掉收集管中的废液。 注：吸附柱的最大容积是850 μl，超过此体积分步上柱，确保全部溶液都通过过滤柱，如果膜上有残留液体，延长离心时间至5分钟，保证膜上无残留液体。 4. 洗脱RNA：   将DNA清除柱放入2 m l RNase-free离心管中，在清除柱中加入500μl 裂解液RL plus，13,000 rpm离心1分钟，收集滤液（注意：RNA在滤液中，不要丢弃），滤液中加入250 μl无水乙醇，此时可能会出现沉淀，立即混匀，不要离心。 5. RNA挂柱：   将全部溶液加入到RNA吸附柱CR中（吸附柱放入收集管中），13,000 rpm离心2分钟，弃废液。 注：确保溶液全部过滤到收集管中，膜上无残留，如有必要，可以延长离心时间至5分钟。 6. 去除RNA中的蛋白污染： 向RNA吸附柱CR中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl 去蛋白液RD，13,000rpm离心1分钟，弃废液。 7. 去除RNA中的其他杂质： 向RNA吸附柱CR中加入700μl漂洗液RW（使用前请先检查是否已加入乙醇）， 13,000 rpm离心1分钟，弃废液。 8. 进一步去除RNA中的其他杂质： 向吸附柱CR中加入500μl漂洗液RW （使用前请先检查是否已加入乙醇），13,000 rpm离心1 分钟，弃废液。 9.  关键步骤：彻底去除吸附柱上的残余乙醇： 将吸附柱CR放回收集管中，确保盖好吸附柱管盖，13,000 rpm将吸附柱CR空甩离心2 分钟，去除吸附柱上的残余液体。 注：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，如果有漂洗液残留，可能会影响后续的RT等实验操作。 10. 洗脱得到RNA： 将RNA吸附柱CR转入一个新的1.5 ml RNase-free离心管中，向吸附柱O型垫圈中央悬空加入50-100 μl RNase-free水（事先65℃预热可提高洗脱效率），盖好吸附柱管盖，常温放置2分钟，13,000rpm离心2 分钟。 注：确保水要加到膜的中央，不要贴壁加入；洗脱缓冲液体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。 11. RNA贮存： RNA样品-80℃中保存。
RNA产量和质量的评估： 1.RNA产量： 用分光光度计测定OD260的吸光值来计算RNA产量。将RNA按照一定的比例稀释于TE溶液（10mMTris pH8.0，1mMEDTA）中，根据以下公式计算： A260×稀释倍数×40=μgRNA/ml 注：测定OD值时，尽量不要用RNase-free水稀释RNA，因为RNase-free水pH较低，测定的OD值偏低。 2.RNA质量： 凝胶电泳检测：凝胶电泳中，完整的RNA应该有两条主带：28S和18S，并且28S亮度应该与18S相当或是其亮度的2倍。可以使用普通的1×TAE琼脂糖凝胶电泳，凝胶浓度1.5%，可以使用高电压，短时间电泳，如7V/cm电泳，20分钟。建议使用D2000DNA ladder（Cat：RTM415）作为Marker。植物28S rRNA迁移率与1500 bp类似，18S rRNA迁移率与1000bp类似。 吸光值检测：可以用A230，A260和A280的数值表示RNA的纯度。纯净的RNA的A260/A280比值应该为2，我们得到的RNA样品比值应在1.8-2.2之间，如果比值低于1.8，表明RNA样品中蛋白污染比较严重。 A260/A230比值应该在2-2.2之间。如果此比值低于2，表明RNA样品中有胍盐，多糖的污染。 实验示例：

免责申明：
本网站所提供的信息，只供参考之用。
本网站及其雇员一概毋须以任何方式就任何信息传递或传送的失误、不准确或错误对用户或任何其他人士负任何直接或间接的责任。
在法律允许的范围内，本网站在此声明,不承担用户或任何人士就使用或未能使用本网站所提供的信息或任何链接或项目所引致的任何直接、间接、附带、从属、特殊、惩罚性或惩戒性的损害赔偿（包括但不限于收益、预期利润的损失或失去的业务、未实现预期的节省）。
本网站所提供的信息，若在任何司法管辖地区供任何人士使用或分发给任何人士时会违反该司法管辖地区的法律或条例的规定或会导致本网站或其第三方代理人受限于该司法管辖地区内的任何监管规定时，则该等信息不宜在该司法管辖地区供该等任何人士使用或分发给该等任何人士。用户须自行保证不会受限于任何限制或禁止用户使用或分发本网站所提供信息的当地的规定。
本网站图片，文字之类版权申明，因为网站可以由注册用户自行上传图片或文字，本网站无法鉴别所上传图片或文字的知识版权，如果侵犯，请及时通知我们，本网站将在第一时间及时删除。
凡以任何方式登录本网站或直接、间接使用本网站资料者，视为自愿接受本网站声明的约束。

通用销售条款
 一． 买方对产品的使用：产品应当用于实验室研究目的，不可用作其他用途（包括但不限于：体外诊断、食品、药物、医疗器械、人用或兽用治疗、化妆品或其他商业用途）。购买方应明确清楚知道此声明，并严格遵守。如有任何因购买方隐瞒真实购买意图，由此引起的法律责任以及一切法律后果，由购买方承担。
二． 准确订货：下订单时，买方应预先仔细审阅产品的技术指标，确认无误。不详之处应立即查询。订单及产品一经发出，即视为买方认可有关产品的技术指标。
三． 质量责任：我司保证所供产品质量与随货COA所列标准相符。买方应以产品制造商的标准作为验收标准。鉴于化学品的特殊性，卖方对未使用之前的产品质量负责，对化学品的应用不负有任何直接与间接的责任。卖方提醒买方：在做实验之前，预先按照技术规范检验产品质量。在产品开始使用之后，买方对应用及其结果负有全部责任。若有质量异议，买方需在收到货物后10个工作日内书面通知卖方，过期无效。
四． 有限保证：在适用法律允许的最大限度内，卖方提供的产品均“按现状条件”提供给买方，卖方不作对产品和/或其使用的各种明示或默示的保证（包括但不限于对适销性、适合用于特殊用途及不侵权的所有明示或默示保证）或卖方产品会达到任何特定结果或不会被中断或不会有错误的保证。
五． 责任限制：在适用法律允许的最大限度内，卖方不对以任何方式由本合同、卖方产品或使用卖方产品引起的或与此有关的任何利润或收入损失或其他后果性损失、随附性损失、特殊损失、惩罚性损失或任何其他间接损失或损害承担责任。在适用法律允许的最大限度内，卖方的最高赔偿限额为买方就所涉及的卖方产品实际支付给卖方的价格。
六． 如卖方因不可抗拒力原因无法供货，卖方将及时通知买方，双方将视情况决定部分不履行、全部不履行或延期履行；如供货期限届满日为国内外重大节日或国家法定假日，则供货期限顺延；若因缺货导致延期交货或无法供货，卖方将及时告知买方，并不视为卖方违约。不可抗力：因火灾、洪水、风暴、爆炸、恐怖事件、战争、政府行为或任何其他卖方无法预见、无法避免和无法克服的事件造成延期交货或无法交货的，卖方不承担任何责任。

订购方式：
（1）直接注册www.ruichubio.com网站会员后直接在线订购支持支付宝、微信和公务卡支付；
（2）拨打021-59145618订购热线订购;
（3）登录www.ruichubio.com下载中心下载订购单发送至：order@ruichubio.com订购
 注：在邮件确认合同或订购单情况下，可以货物和发票一起寄送，对公转账。

发票：
本公司出具增值税普通发票和增值税专用发票，适合您报销。发票面额为含税后的货物价格和运费，请您放心购买，我们会将运费开进发票里。请在拍下时在备注一栏里写上发票抬头。

支付：
开票账户：
公司名称             上海瑞楚生物科技有限公司
电话                    021-60543596
纳税人识别号       91310116057685530X
开户银行全称       中国银行股份有限公司上海市长宁支行
帐号                    454663168779 支付宝转账请支付到如下账户
帐 户 名        上海瑞楚生物科技有限公司
账     号         epay@ruichubio.com

为了方便高校科研单位公务卡结算，本网站开通了公务卡支付。可以在线下单选择支付宝付款，登录支付宝账号添加银行卡（输入公务卡号就可以）（公务卡一般就是信用卡,请按信用卡支付方式支付)。
​
运输：
（1）生物试剂需要冷冻运输，运输需要泡沫盒和一定量的冰袋（特殊商品需要干冰），运费金额会开进发票里。运费以显示为准
（2）常规试剂采用快递，运费以显示为准。
（3）大物件一般默认发德邦物流，运费需联系客服计算。