超低分子量蛋白电泳试剂盒（货号：RTD6120）
     产品组成： 组分货号 组分 名称 规格 贮存 运输 RTD6120-01 组分1 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 15 ml 4℃ 常温 RTD6120-02 组分2 2×多肽电泳分离胶缓冲液 30 ml 4℃ 常温 RTD6120-03 组分3 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 15 ml 4℃ 常温 RTD6120-04 组分4 2×PAA溶液 超低分离胶用 30 ml 4℃ 常温 AP020P 组分5 10% APS（干粉） 5 ml 常温 常温 TA0761-01 组分6 TEMED 0.5 ml 常温 常温 CB010P 组分7 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) 500 ml（干粉） 常温 常温 TP050 组分8 2×Tricine 上样缓冲液（含还原剂） 1 ml -20℃ 常温 RTD6202-02 组分9 FastBlue蛋白染色液 500 ml 常温 常温
产品简介： 本试剂盒含有超低分子量蛋白电泳（多肽电泳）全套试剂，可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶（8×10cm）。具有以下特点： 1 适用范围广：2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS，适用于多肽的变性和非变性电泳。 2 分辨率高：凝胶缓冲液独特配方，可以有效分离1-5kD多肽。 3 稳定性高：凝胶缓冲液pH为中性，存放时间长。 4 使用方便：配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液，加上APS和TEMED即可配制凝胶。
贮存和效期： 按照标签温度贮存；开封后有效期一年。
使用说明： 一. 10% APS配制： 10% APS配制-5 ml：将APS干粉溶于5 ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少常温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10% APS。 二. 制胶： I 配制分离胶 1．按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合；立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 表一  （一块1 mm mini胶用量）*   分离胶 浓缩胶   18％T /5 ml 5％T /2 ml 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 / 1 ml 2×多肽电泳分离胶缓冲液 2.5 ml / 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 / 1 ml 2×PAA溶液 超低分离胶用 2.5 ml / 10％APS 25-50 μl** 20-30 μl TEMED 2.5-5 μl 2 μl 注： * 如非必须，不要使用厚度1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。 ** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。 表二 超低凝胶制备凝固时间表 环境温度 20℃ 25℃   分离胶配制 浓缩胶配制 分离胶配制 浓缩胶配制 分离胶配制量 5 ml - 5 ml - 浓缩胶配制量 - 2 ml - 2 ml 10%APS 50 μl 20 μl 25 μl 20 μl TEMED 5 μl 2 μl 2.5 μl 2 μl 凝固时间 5-10 分钟 20-30 分钟 5-10 分钟 20-30 分钟 2．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层，使凝胶表面保持平整。 3．静置5-10分钟，待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。 II 配制浓缩胶 去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。 1．按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合；立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 2．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。 3．静置20-30分钟待凝胶聚合 三. 电泳： 1. 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制： 将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液（10×TTS）粉末（Cat No：CB010P）置于一干净的一升烧杯中，加入500ml超纯水，彻底搅拌混匀，不要调节pH，即配成500ml 10×TTS缓冲液。 表三 1×TTS缓冲液配制   1×TTS配制量 500 ml 1×TTS配制量 1000 ml 10×TTS 50 ml 100 ml 超纯水 450 ml 900 ml 注：伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。 2. 样品处理：   待上样的检测样品与2×Tricine上样缓冲液[Cat No：TP050]等体积混合，75℃处理5-10分钟后上样。蛋白Marker一般已经含有上样缓冲液，根据说明书上样（预染Marker不能加热处理，非预染Marker上样前一般要75℃处理5-10分钟）。 将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液，轻柔拔出梳子，用1ml移液器将梳孔吹洗干净，将Marker或蛋白样品（已经过处理）加入点样孔，稳压电泳（表四），至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。 表四 多肽电泳条件 恒电压 150V 起始电流 60-75mA/板胶 结束电流 15-25mA/板胶 电泳时间 2.5-3小时 四. 染色（使用组分9-FastBlue蛋白染色液）：
用前必读： 1 使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。 2以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。
使用方法： 1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中，加入适量染色液（以刚刚覆盖过胶面为适），条带1-2分钟即可见。 2. 摇床上常温摇动10-15分钟。 3. 观察结果。
注意事项： 1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm和1mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长染色的时间。 2. 常规染色所需的漂洗，固定，脱色步骤都无必要。 3. 本染色液可以重复利用1-2次，敏感性会有轻微下降，请延长染色时间。 4.本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。使用后，请盖好瓶盖，常温密封保存。  缓冲液配方： 1.10x Tricine-Tris-SDS缓冲液 (1 L)    (Cat No:CB010P)  组分浓度：1 MTris,1 MTricine, 1% SDS Trisbase 121.1 g Tricine    179.2 g SDS         10 g ddH2O      to1 L  Do notadjust the pH (~pH 8.3) 2. 2×Tricine蛋白样品加样缓冲液（10ml）  (Cat No:TP050) 组分浓度：100 mMTris-HCl, pH 6.8, 24% glycerol, 8% SDS,0.2MDTT，0.02% Coomassie Brilliant Blue G-250 1ml 1MTris-Cl pH6.8 2.4ml 甘油 0.8g  SDS 0.31gDTT 2mg 考马斯亮蓝G-250 用灭菌ddH2O定容至10ml 混匀分装-20℃贮存备用 多肽电泳配套试剂 名称 货号 规格 超低分子量蛋白电泳试剂盒 RTD6120 10次 超低分子量蛋白Marker I（3.3-20.1 kD） RTD6101 10次（100 μl） 超低分子量蛋白Marker III（3.4-100 kD） RTD6125 10次（50 μl） 彩虹预染超低分子量蛋白Marker（1.2-45 kD） RTD6110 10次 （50 μl） 彩虹预染超低分子量蛋白Marker II（3-40 kD） RTD6145-01 10次 （50 μl） 40% PAA（19:1） AC1914-01 100ml 40% PAA（29:1） AC2914-01 100ml 4×多肽电泳凝胶缓冲液 GB010-100ml 100ml 2×Tricine 上样缓冲液（变性，还原） TP050 10×1ml FastBlue蛋白染色液 RTD6202 500ml 乙二醇（电泳级） EA0582-02 100 ml 10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(变性电泳，粉末型) CB010P 500 ml 10×阳极缓冲液 （多肽电泳用） AB080 250 ml 10×阴极缓冲液（多肽电泳用） CB010 100 ml   使用该产品发表部分文章列表： 1. [2016 IF=1.75] Metal-Chelate Affinity Precipitation with Thermo-Responsive Polymerfor Purification of ε-Poly-L-Lysine. Product：RTD6120 超低分子量蛋白电泳试剂盒 Author: Sipeng Li, Zhaoyang Ding, Jifu Liu, Xuejun Cao. Journal: Appl BiochemBiotechnol. May 20 2017. Institution：EastChinaUniversity of Science and Technology Paper link： https://link.springer.com/article/10.1007/s12010-017-2495-3   2. [2020 IF=2.896] Rapid and sensitive detection ofStaphylococcus aureus and Klebsiella pneumonia based on bacitracin-modifiedFe3O4@PDA magnetic beads combined with matrix-assisted laser desorptionionization-time of flight mass spectrometry.  Product：RTD6120 超低分子量蛋白电泳试剂盒；RTD6110 彩虹预染超低分子量蛋白Marker Author: Feng Qin，Xiangmin Zhang  Journal: AnalyticalMethods 2021，13，2804 Institution： Department of Chemistry, FudanUniversity, Paper link：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34075956/

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