彩虹预染超低分子量蛋白质Marker II(3-40 kD) Rainbow Prestained Ultra Low Molecular WeightProtein Marker II(3-40 kD) 产品编号及规格: RTD6145-01 10 T(50 μl) RTD6145-02 50 T(250 μl) 储存条件: -20℃保存,有效期12个月 产品简介: 彩虹预染超低分子量蛋白质Marker II可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品由9种多肽和蛋白质组成,分子量大小为 3 kD,4.2 kD,6.5 kD,10 kD(绿色),15 kD,20 kD,25 kD,30 kD,40 kD(红色) (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。)。 使用说明: 第一次收到该产品,常温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底。 一. 制胶: I 配制分离胶 1.按照表一将不同体积的双蒸水、40% PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。 2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。 3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的无水乙醇,使凝胶表面保持平整。 4.静置15-30分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。 表一 (一块1 mm mini胶用量) 分离胶 浓缩胶 18%T, 5%C /5 ml 5%T, 3.3%C/2 ml 40% PAA(19:1) 2.25 ml / 40% PAA (29:1) / 0.25 ml 4×凝胶缓冲液 1.25 ml 0.5 ml 乙二醇(电泳级) 1.5 ml / ddH2O / 1.25ml 10%APS 50 μl 20 μl TEMED 5 μl 2 μl II 配制浓缩胶 去除覆盖在分离胶上的乙醇层,用滤纸将残留乙醇吸去。 1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。 2.加入10%过硫酸铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。 3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。 4.静置30-60分钟装待凝胶聚合 二. 电泳: 1. 取Marker样品,充分混匀后备用。不要加热处理。 2. 电泳前,将10×阳极缓冲液(Cat No:AB080)和10×阴极缓冲液(Cat No:CB010)用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的外槽加入1×阳极缓冲液,内槽加入1×阴极缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,参考下表进行电泳,至每条带都清晰可见时停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。 表二 多肽电泳条件 恒电压 150V 起始电流 60-75mA/板胶 结束电流 15-25mA/板胶 电泳时间 2.5-3小时 三. 染色 根据常规实验步骤,用配方6和7(表三)进行染色和观察。如果使用配方6进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(Cat No:RTD6201),该产品除具有染色快,无毒,灵敏性高等特点外,还能对小肽在染色中起到固定作用,不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离,是常规染色液的理想替代品。 注:预染蛋白Marker由于嵌合了染料,在不同的凝胶系统中迁移率会有不同,因此只能用来粗略估计目的蛋白的大小。如要精确确定蛋白的大小,请在同一凝胶系统中用非预染蛋白Marker来标定预染蛋白Marker的分子量。 表三 小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制 1. 40%PAA(29:1)(配制浓缩胶) 货号: AC2914 丙稀酰胺 38.67g 甲叉双丙稀酰胺 1.33g 用ddH2O溶解后定容至100 ml,过滤后使用。 贮存:4℃ 2. 40% PAA(19:1) (配制分离胶) 货号:AC1914 丙稀酰胺 38 g 甲叉双丙稀酰胺 2 g 用ddH2O溶解后定容至100 ml,过滤后使用。 贮存:4℃ 3. 4×凝胶缓冲液(配制凝胶用) 货号:GB010 [3 M Tris; 0.3% SDS; pH8.45] Tris碱 36.3 g;ddH2O 80ml 0.3 g SDS或3 ml 10% SDS 用HCl调pH值至8.45;用ddH2O定容至100 ml 贮存:4℃ 4. 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液) 货号:AB080 [2 M Tris pH8.9] Tris碱 121.1g;ddH2O 400ml;用HCl调pH值至8.9;用ddH2O定容至500ml 贮存:4℃ 注:使用前稀释成1×阳极缓冲液使用。 5. 10×阴极缓冲液(上槽缓冲液) 货号:CB010 [1 M Tris; 1 M Tricine ;1% SDS; pH 8.3] Tris碱 121.14g;Tricine 179.2g;SDS 10 g 用ddH2O溶解,定容至1000 ml(不用调pH)。 贮存:4℃ 注:使用前稀释成1×阴极缓冲液使用 6. 染色液 货号:RTD6203 冰醋酸 100 ml 考马斯亮蓝G-250 0.25 g 水 900 ml 7. 脱色液 货号:RTD6204 冰醋酸 100 ml 水 900 ml 8. 2×Tricine蛋白样品上样缓冲液(10ml) 货号:TP050 1ml1MTris-HCl pH6.8;2.4 ml 甘油;0.8 g SDS;0.31 g DTT(或者400 μl β-巯基乙醇);2 mg 考马斯亮蓝G-250;用灭菌水定容至10ml 混匀分装-20℃贮存备用 多肽电泳配套试剂 名称 货号 规格 超低分子量蛋白电泳试剂盒 RTD6120 10次 超低分子量蛋白Marker I(3.3-20.1 kD) RTD6101 10次(100 μl) 超低分子量蛋白Marker III(3.4-100 kD) RTD6125 10次(50 μl) 彩虹预染超低分子量蛋白Marker(1.2-45 kD) RTD6110 10次 (50 μl) 彩虹预染超低分子量蛋白Marker II(3-40 kD) RTD6145-01 10次 (50 μl) 40% PAA(19:1) AC1914-01 100ml 40% PAA(29:1) AC2914-01 100ml 4×多肽电泳凝胶缓冲液 GB010-100ml 100ml 2×Tricine 上样缓冲液(变性,还原) TP050 10×1ml FastBlue蛋白染色液 RTD6202 500ml 乙二醇(电泳级) EA0582-02 100 ml 10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(变性电泳,粉末型) CB010P 500 ml 10×阳极缓冲液 (多肽电泳用) AB080 250 ml 10×阴极缓冲液(多肽电泳用) CB010 100 ml 使用蛋白Marker产品发表部分文章列表: 1. [2021 IF=5.5] Garviecin LG34, a novel bacteriocin produced by Lactococcus garvieaeisolated from traditional Chinese fermented cucumber. Author: Yurong Gao, Dapeng Li, Shan Liu, Liyuan Zhang Marker: RTD6110,彩虹超低分子量蛋白Marker(1.2-45 kD) Journal: Food Control 50 (2015) 896e900 Institution:Key Laboratory of Veterinary Medicine of Heilongjiang Bayi Agricultural University Paper link:http://dx.doi.org/10.1016/j.foodcont.2014.10.040 2. [2021 IF=5.5] Purification and partial characterization of M1-UVs300, a novel bacteriocin produced by isolated from fermented sausage Lactobacillus plantarum. Author: Yu An, Ying Wang, Xiaoyue Liang, Huaxi Yi, Zhaohang Zuo, Xiaoxi Xu, Dongjie Zhang, Changqing Yu, Xue Han Marker: RTD6110,彩虹超低分子量蛋白Marker(1.2-45 kD) Journal: Food Control Volume 81, November 2017, Pages 211-217 Institution:Key Laboratory of Veterinary Medicine of Heilongjiang Bayi Agricultural University Paper link:https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2017.05.030 3. [2021 IF=5.75] The Verticillium dahliae SnodProt1-Like Protein VdCP1 Contributes to Virulence and Triggers the Plant Immune System. Author: Yi Zhang, Yuhan Gao, Yingbo Liang, Yijie Dong, Xiufen Yang, Jingjing Yuan and Dewen Qiu Marker: RTD6110,彩虹超低分子量蛋白Marker(1.2-45 kD) Journal: Frontiers in Plant Science. Volume 81, November 2017, Pages 211-217 Institution:Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences Paper link:https://doi.org/10.1093/jxb/ery351 4. [2021 IF=2.99] Purifcation, characterization, and action mechanism of plantaricin DL3, a novel bacteriocin against Pseudomonas aeruginosa produced by Lactobacillus plantarum DL3 from Chinese Suan Tsai. Author: Xinran Lv, Yang Lin ,Yu Jie, Mengtong Sun, Bolin Zhang,Fengling Bai,Hongfei Zhao,Jianrong Li Marker: RTD6127,超低分子量蛋白Marker IV(3.3-45 kD) Journal: European Food Research and Technology. Vol 244, pages 323–331 (2018) Institution:College of Biological Science and Biotechnology, Beijing Forestry University Paper link:https://link.springer.com/article/10.1007/s00217-017-2958-3 5. [2021 IF=6.99] Verticillium dahliae Alt a 1-like protein PevD1 targets cotton PR5-like protein and contributes to fungal infection. Author: Yi Zhang, Yuhan Gao, Yingbo Liang, Yijie Dong, Xiufen Yang, Dewen Qiu Marker: RTD6110,彩虹超低分子量蛋白Marker (1.2-45 kD) Journal: Journal of Experimental Botany, Vol 70, Issue 2, 15 January 2019,613-626 Institution:Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences Paper link:https://doi.org/10.1093/jxb/ery351 6. [2021 IF=11.277] An Alternative Splicing Variant of PtRD26 Delays Leaf Senescence by Regulating Multiple NAC Transcription Factors in Populus. Author: Hou-Ling Wang,Yi Zhang,Ting Wang, Qi Yang,Yanli Yang,Ze Li, Bosheng Li, Xing Wen, Wenyang Li, Weilun Yin, Xinli Xia, Hongwei Guo, and Zhonghai Li Marker: RTD6110,彩虹预染超低分子量蛋白(1.2-45 kD) Journal: Plant Cell. Volume 33, Issue 5, May 2021, Pages 1594–1614 Institution:Beijing Advanced Innovation Center for Tree Breeding by Molecular Design, Beijing Forestry University Paper link:https://doi.org/10.1093/plcell/koab046 7. [2021 IF=2.89] Rapid and sensitive detection ofStaphylococcus aureus and Klebsiella pneumonia based on bacitracin-modified Fe3O4@PDA magnetic beads combined with matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry. Author: Feng Qin, Shujuan Wang, Mingxia Gao and Xiangmin Zhang Marker: RTD6110,彩虹预染超低分子量蛋白(1.2-45 kD) Journal: Analytical Methods. 2021,13, 2804-2811 Institution:Department of Chemistry, Fudan University Paper link:https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2021/ay/d1ay00614b 8. [2021 IF=3.74] Cloning, expression, and function of ferritins in the tick Haemaphysalis flava. Author: Yu Zhao, Lei Liu, Jin-Bao Liu, Cong-Ying Wu, De-Yong Duan, Tian-Yin Cheng Marker: RTD6142 高分子量非变性电泳蛋白质Marker II(45-669 kD) Journal: Ticks and Tick-borne Diseases. Volume 13, Issue 2, March 2022, 101892 Institution:College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Paper link:https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1877959X21002454 9. [2021 IF=0.886] Purification and Characterization of an Intracellular β-Glucosidase from the Protoplast Fusant of Aspergillus oryzae and Aspergillus niger Author: F.M. Zhu, B. Du, H.S. Gao, C.J. Liu, and J. Lia Marker: RTD6109 高分子量蛋白质Marker(43-200 kD) Journal: Applied Biochemistry and Microbiology, 2010, Vol. 46, No. 6, pp. 626–632 Institution:College of Food Science and Technology, Hebei Normal University of Science and Technology Paper link:https://link.springer.com/article/10.1134/S0003683810060116 10. [2021 IF=4.374] Effect of Fuzhuan brick-tea addition on the quality and antioxidant activity of skimmed set-type yoghurt. Author: Dong Liu Marker: RTD6103 低分子量蛋白质Marker II(14.4-116 kD) Journal: International Journal of Dairy Technology, Vol 71 March 2018 Pages 22-33 Institution:Department of Food Processing Technology, Anqing Vocational & Technical College Paper link:https://doi.org/10.1111/1471-0307.12395 11. [2021 IF=3.7] Smart delivery of poly-peptide composite for effective cancer therapy Author: Xin Yuan, Yingzhou Qin, Qingmei Tian, Cuijuan Liu, Xiangzhou Meng, Bo Qie, Fan Gao, Ying Huang, Guanghui Xu, Guang Yang, Yimin Zhu Marker: Protein Marker Journal: Biomedical Materials, 2022 Jan 24;17(2) Institution:School of Nano-Tech and Nano-Bionics, University of Science and Technology of China Paper link:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34996052/
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